1.直接檢查
栝樓種子隨機取500粒,將樣品放在白紙上,觀察整齊度、色澤、蟲叮、病斑等外觀現象。
2.種子外部檢查
(1)吸水紙法:
在培養皿中放3層吸水紙,用無菌水濕潤,瀝去多余水分,把5粒種子播在紙上,蓋好培養皿,重復10次,在20℃吸漲1d后,在28℃恒溫培養箱培養,經過3~5d培養后,檢查種子外部是否存在病原菌。
(2)洗滌法:
將100粒種子在無菌水中浸泡30min,用力振蕩,將洗滌液稀釋100倍,分別在營養瓊脂和虎紅培養基涂皿,細菌和真菌分別在37℃、28℃恒溫培養箱培養,檢測種子外表攜帶的細菌和真菌,并進一步鑒定特定菌。
3.種子內部檢查
將100粒種子在1%次氯酸鈉溶液中消毒30min,再用無菌水洗滌3次后浸泡2h,剖開后分別接種在營養瓊脂和虎紅培養基上,細菌和真菌分別在37℃、28℃培養箱培養,經過3~7d培養后,檢查種子內部是否存在病原菌,并進一步鑒定特定菌。
試驗結果表明,5份種子均不含致病菌,所攜帶一定量的真菌和細菌對種子發芽以及苗期生長基本無不良影響。
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